Bovine Pregnancy Test IDEXX Inc. ИФА-Тест для ранней диагностики стельности КРС по крови

IFA-Test dlja rannej diagnostiki stel'nosti KRS po krovi   Особого внимания заслуживает новейшая разработка компании IDEXX Laboratories Inc. (США) – ИФА- тест для определения стельности ( Bovine Pregnancy Test"   ). Данный тест основан на иммуноферментном анализе и «маркером» стельности является не прогестерон (как в большинстве тестов), а  гликопротеины, которые образуются только в период стельности (PAG), благодаря чему достоверность данного теста, начиная с 28 дня после осеменения,  свыше 98%.

Название и предназначение
IDEXX Bovine Pregnancy Test – тест-система на основе иммуноферментного анализа для раннего определения гликопротеинов ассоциированных со стельностью коров (ранних PAGs) как маркеров стельности в сыворотке или EDTA плазме крови крупного рогатого скота, сыворотке крови мелкого рогатого скота.
 
Общая информация         
Точное и своевременное выявление стельности у молочных коров является на сегодняшний день важнейшим компонентом программ репродукции. Ветеринары и фермеры используют раннее выявление не стельных (яловых) коров, чтобы ускорить повторное осеменение, уменьшить интервал между отелами и, таким образом, максимально увеличить молочную продуктивность и доходность предприятия. Традиционно стельность определяется ректальной пальпацией или трансректальным ультразвуковым исследованием коров (TU). Тест-система IDEXX для определения стельности коров дает возможность при помощи лабораторного метода точно определить раннюю стельность через 28 дней после осеменения, что является для ветеринаров и фермеров на молочных фермах важным инструментом в раннем выявлении стельных коров. Тест может быть использован не ранее 60 дней после отела.
Мелкий и крупный рогатый скот
 
Точное и своевременное выявление стельности у молочных коров является на сегодняшний день важнейшим компонентом программ репродукции. Ветеринары и фермеры используют раннее выявление не стельных (яловых) коров, чтобы ускорить повторное осеменение, уменьшить интервал между отелами и, таким образом, максимально увеличить молочную продуктивность и доходность предприятия. Традиционно стельность определяется ректальной пальпацией коров или с помощью ультразвукового исследования органов брюшной полости мелкого рогатого скота (овец, коз). Тест-система IDEXX для определения стельности коров дает возможность при помощи лабораторного метода точно определить раннюю стельность через 28 дней после осеменения у коз, через 35 дней – у овец и через 30 дней – у коров. Тест может быть использован не ранее 60 дней после отела коровы. Для овец и коз требования к периоду после ягнения не установлены.
Характеристики эффективности IDEXX Bovine Pregnancy Test см. в валидационном отчете.
Тест для ранней диагностики стельности КРС по крови
 
Описание/Принципы
 
IDEXX Bovine Pregnancy Test – тест-система на основе иммуноферментного анализа для раннего определения как маркеров стельности (ранних PAGs) - гликопротеинов ассоциированных со стельностью в сыворотке или EDTA плазме крови коров. На внутренней поверхности лунок микропланшета адсорбированы анти-PAG антитела. После разведения и инкубации исследуемых проб в лунках микропланшета, связанные PAG обнаруживаются с помощью PAG-специфических антител (детектор-раствор) и конъюгата меченым пероксидазой хрена (HRPO конъюгат). Несвязанный коньюгат удаляется промывкой и в каждую лунку добавляется TMB субстрат. Интенсивность цветового окрашивания пропорциональна содержанию PAG в исследуемых пробах.
Хранение
 Все реагенты хранить при 2-8°C. При условии надлежащего хранения реагенты остаются стабильными до истечения срока годности.
 
Тест для ранней диагностики по крови
Необходимые материалы (не постовляемые)
  • Одно- и многоканальные дозаторы (микропипетки)
  • Одноразовые наконечники
  • Градуированный цилиндр для промывочного раствора
  • Ридер для чтения 96-луночных планшет, оснащенный светофильтром на 450 nm и референс-фильтром (620 nm-650 nm).
  • Устройство для промывки планшетов (ручная, полуавтоматическая и автоматическая система)
  • При подготовке реагентов для теста используйте только дистиллированную или деионизированную воду
  • Крышки для микропланшетов (колпачок, алюминиевая фольга или клейкая пленка)
  • Вортекс (вихревая мешалка) или аналогичное устройство
  • Камера влажности/ инкубатор для планшетов, с поддерживаемой температурой 37°C (± 2°C)
 
Меры предосторожности и предупреждения пользователей
 
  • Обращайтесь с биологическим материалом как с потенциальным возбудителем инфекции.
  • При работе с пробами и реагентами надевайте защитные перчатки/ защитную одежду/ средства защиты глаз или лица.
  • Дополнительную информацию см. в инструкции по безопасному обращению с материалом.
  • Информацию о риске и мерах предосторожности см. в конце вкладыша.
 
Лабораторная практика
 
  • Оптимальный результат будут получены при строгом соблюдении этой методики постановки. Аккуратное пипетирование, выдержка интервала времени инкубации и промывки на протяжении всего исследования способствуют получению точных и достоверных результатов. Для каждой пробы и контрольного образца используйте отдельную пипетку.
  • Не оставляйте раствор TMB на свету или под воздействием окисляющих агентов. При работе с раствором TMB используйте чистую стеклянную или пластиковую посуду.
  • Все отходы перед утилизацией должны быть обеззаражены. Утилизируйте отходы в соответствии с местными, региональными или национальными требованиями
  • Необходимо соблюдать осторожность для предотвращения загрязнения компонентов набора. Не сливайте неиспользованные реагенты обратно в емкость.
  • Не используйте компоненты набора по истечении срока годности.
 
Подготовка РеагентовТест по крови
 
Промывочный раствор
10X-кратный промывочный раствор должен быть доведен до комнатной температуры (18-26°C) и перемешан для гарантированного растворения выпавших кристаллов соли. Перед использованием промывочный концентрат должен быть разведен в 10 раз (1/10) дистиллированной/деионизированной водой (например, 30 мл концентрата плюс 270 мл воды). Промывочный раствор, при приготовлении его в стерильных условиях, можно хранить в течение 1 недели при 2-8°C.
 
Порядок выполнения исследования
Перед использованием доведите все реагенты до комнатной температуры (18-25°C). Перемешайте реагенты легким покачиванием или вращением.
  1. Подготовьте запечатанные планшеты из набора и запишите местоположение исследуемых проб в рабочем журнале. Используйте столько стрипов с микролунками, сколько необходимо для проведения исследования; неиспользуемые стрипы поместите в воздухонепроницаемый пакет с влагопоглотителем и уберите в холодильник при 2-8°C.
  2. Внесите по 25 мкл раствора для разведения проб в лунки, предназначенные для контролей и исследуемых проб.
  3. Внесите по 100 мкл отрицательного контроля в две лунки планшета для исследований.
  4. Внесите по 100 мкл положительного контроля в следующие две лунки планшета.
  5. Внесите по 100 мкл исследуемых проб в соответствующие лунки.
  6. Осторожно постукивайте планшет для перемешивания.
  7. Накройте лунки и инкубируйте 60 минут (± 5 минут) при 37°C (±2°C). Планшет должен быть плотно и герметично закрыт во избежание испарения.
  8. Удалите жидкое содержимое каждой лунки  и промойте каждую лунку 3 – 5 раз промывочным раствором в количестве 300 мкл. Избегайте пересыхания лунок между промывками и перед добавлением следующего реагента. После последней промывки удалите остатки жидкости путем постукивания каждого планшета об адсорбирующий материал.
  9. Внесите по 100 мкл детектор-раствора в каждую лунку.
  10. Накройте лунки и инкубируйте 30 минут (± 2 минуты) при температуре 18-26°C.
  11. Повторите шаг 8.
  12. Внесите по 100 мкл раствора конъюгата в каждую лунку.
  13. Накройте лунки и инкубируйте 30 минут (± 2 минуты) при температуре 18-26°C.
  14. Повторите шаг 8.
  15. Внесите по 100 мкл раствора TMB субстрата №.12 в каждую лунку.
  16. Инкубируйте 15 минут (± 1 минута) при температуре 18-26°C.
  17. Внесите по 100 мкл стоп-растовра №.3 в каждую лунку.
  18. Измерение и запись результатов для исследуемых проб и контролей производят при A(450 nm)-A(REF). Длина волны референс-фильтра должна быть A(620 nm-650 nm).
Интерпретация результатов (крупный и мелкий рогатый скот)
Расчет результатов.
Контроли
NCx = (NC1 A(450-REF) + NC2 A(450-REF)) / 2
                                
PCx = (PC1 A(450-REF) + PC2 A(450-REF)) / 2
         
Критерий валидности
PCx – NCx ≥ 0.300                                NCx ≤ 0.150
 
Пробы
S – N = Проба A(450-REF) – NCx
 
Интерпретация результатов (крупный и мелкий рогатый скот)
 
Яловая                                   Стельная
S – N < 0.300                                         S – N ≥ 0.300 
  Повторная проверка стельности (только для крупного рогатого скота): Эмбриональная смертность распространена на ранних стадиях стельности коров. PAGS могут циркулировать у коров/телок еще в течение некоторого времени после ранней гибели эмбриона.
Если значение SN равно или больше 0,300 и меньше, чем 1,000, рекомендуется дополнительная перепроверка животного через 7-10 дней.
IDEXX рекомендует производителям работать в тесном контакте с ветеринарными специалистами, чтобы разрабатывать программы управления репродуктивностью, соответствующие рабочим процессам.
Причиной недостоверного анализа может быть нарушение методики. Повторите пробу, точно следуя указаниям, изложенным во вкладыше.
 
Примечание: IDEXX располагает инструментами и программным обеспечением для расчета результатов и составления сводки данных.

Предупреждающая информация!
 
H319 / P280 / P337+P313
Положительные контроли – вызывают сильное раздражение глаз. Если раздражение не проходит, обратитесь к врачу.
 
H315 / H319 / P280 / P332+P313 / P337+P313
ТМВ субстрат – вызывает раздражение кожи. Вызывает сильное раздражение глаз. Надевайте защитные перчатки, средства защиты глаз или лица. Если возникло раздражение кожи, обратитесь к врачу. Если не проходит раздражение глаз, обратитесь к врачу.
 
H302 / H315 / H317 / H319 / H335 / P280 / P333+P313 / P337+P313 / P363
Стоп-раствор – вреден при попадании внутрь (проглатывании). Вызывает раздражение кожи. Может вызвать серьезную аллергическую кожную реакцию. Вызывает сильное раздражение глаз. Может вызвать раздражение органов дыхания. Надевайте защитные перчатки, средства защиты глаз или лица. Если возникло раздражение кожи или сыпь, обратитесь к врачу. Если не проходит раздражение глаз, обратитесь к врачу. Постирайте загрязненную одежду перед повторным использованием.
 
EUH208
Детектор-раствор - содержит катон, может вызывать аллергические реакции.
 


Узнать цену

Это интересно