Колилерт-18

Colilert*-18 либо одновременно обнаруживает общие колиформные бактерии и E. coli, либо фекальные колиформные бактерии в воде. Он основан на запатентованной технологии специфического субстрата IDEXX*. Когда общие или фекальные колиформные бактерии метаболизируют индикатор питательных
веществ Colilert-18 DST*, ONPG (O-нитрофенил-бета-D-галактопиранозид), образец становится желтым. Когда E. coli метаболизирует индикатор питательных веществ Colilert-18 DST*, MUG, образец также флуоресцирует. Colilert-18 может одновременно обнаруживать эти бактерии при концентрации 1 КОЕ/100 мл
в течение 18 часов, даже с 2 миллионами гетеротрофных бактерий на 100 мл.

Хранение теста

Хранить при температуре 2-25°C в защищенном от света месте. Процедура наличия/отсутствия (P/A)
1. Добавьте содержимое одной упаковки к образцу объемом 100 мл в стерильном прозрачном нефлуоресцентном флаконе.
2. Закройте флакон крышкой и встряхните.
3. Если образец еще не достиг температуры 33-38°C, поместите флакон на водяную баню с температурой 35°C на 20 минут или, в качестве альтернативы, на водяную
баню с температурой 44,5°C на 7-10 минут.
4. Инкубируйте при температуре 35 ± 0,5°C в течение оставшихся 18 часов.
5. Считайте результаты в соответствии с таблицей Интерпретации результатов ниже. 

Процедура подсчета Quanti-Tray*

1. Добавьте содержимое одной упаковки к образцу воды комнатной температуры объемом 100 мл в стерильном флаконе.
2. Закройте флакон крышкой и встряхните до полного растворения.
3. Влейте смесь образца/реагента в Quanti-Tray* или Quanti-Tray*/2000 и запечатайте герметиком IDEXX Quanti-Tray*.
4. Поместите запечатанный лоток в инкубатор с температурой 35 ± 0,5°C (или 44,5 ±0,2 °C для фекальных колиформ) на 18 часов (предварительный нагрев до 35°C не требуется). Для инкубации на водяной бане опустите Quanti-Tray, как есть, ниже уровня воды с помощью утяжеленного кольца.
5. Считайте результаты в соответствии с таблицей Интерпретации результатов ниже. Подсчитайте количество положительных лунок и обратитесь к таблице MPN,
прилагаемой к лоткам, чтобы получить наиболее вероятное число.

Интерпретация результата

• Проверьте наличие флуоресценции с помощью 6-ваттного УФ-излучения в 365 нм в пределах 5 дюймов от образца в темноте. Отведите свет в направлении от глаз к образцу.

• Результаты Colilert-18 следует считать по прошествии 18 часов с момента инкубации.

• Однако, при получении сомнительного результата лицом, проводящим тест, при первом считывании, проведите дополнительную инкубацию до четырех часов (общее время инкубации не должно превышать 22 часа), для того, чтобы цвет и/или флуоресценция усилились.

• Положительные результаты, как для общих колиформных бактерий, так и для E. coli, полученные в течение периода до 18 часов, и отрицательные, полученные по прошествии 22 часов, также являются действительными.

• Кроме того, лаборатории могут инкубировать образцы в течение более длительного времени (общее время инкубации до 22 часов) для их удобства.

Процедурные заметки

• Легкий оттенок может наблюдаться при добавлении Colilert-18 в образец.

• Если избыток пены вызывает проблемы при использовании Quanti-Tray, вы можете использовать раствор пеногасителя IDEXX Antifoam Solution (№ по каталогу: WAFDB) или флаконы IDEXX на 120 мл с пеногасителем (№ по каталогу: WV120SBAF-200).

• В данном листке-вкладыше могут быть не отражены местные нормативные правила. Для тестирования на соответствие обязательно следуйте соответствующим нормативным процедурам. Например, образцы, исследуемые в других странах, следует инкубировать при 36 ± 2°C в течение 18-22 часов.

• Colilert-18 можно исследовать в любом формате с несколькими пробирками. Для определения наиболее вероятных величин (MPN) следует использовать стандартные методы исследования таблиц MPN для воды и сточных вод.

• Если в образце воды присутствует фоновый цвет, сравните инокулированный Colilert-18 образец с контрольной пробой того же образца воды.

• Colilert-18 можно использовать для обнаружения E. coli (но не колиформных бактерий) в морской воде. Образцы необходимо разбавить не менее чем в десять раз. Умножьте значение MPN на коэффициент разбавления, чтобы получить точный количественный результат.

• Для разбавления используйте только стерильную воду без буфера и окислителя.

• Colilert-18 - это тест для первичной воды. Рабочие характеристики Colilert-18 не применяются к образцам, измененным каким-либо предварительным обогащением или образцам с изменой концентрацией.

• В образцах с избыточным содержанием хлора при добавлении Colilert-18 может наблюдаться синяя вспышка. В этом случае, образец следует рассматривать, как недействительный, и следует прекратить тестирование.

• При использовании Colilert-18 всегда следует соблюдать методы асептики. Утилизируйте в соответствии с надлежащей лабораторной практикой.

Процедуры контроля качества - Общие колиформные бактерии и E. coli

1. Для каждой партии Colilert-18 рекомендуется одна из следующих процедур контроля качества:

• Контроль качества колиформных бактерий и E. coli IDEXX: Escherichia coli, Kiebsiella varicola и Pseudomonas aeruginosa.

• Quanti-Cult* Escherichia coli, Kiebsiella varicola и Pseudomonas aeruginosa.

• Заполните три стерильных флакона 100 мл стерильной воды без буфера и окислителя и инокулируйте с помощью стерильной петли штаммов ATCC, Escherichia coli ATCC 25922 / WDCM 00013 или ATCC 11775 / WDCM 00090, Kiebsiella varicola ATCC 31488 / WDCM 00206 и Pseudomonas aeruginosa ATCC 10145 / WDCM 00024 или ATCC 27853.

2. Выполните описанную выше процедуру P/A или процедуру подсчета количества Quanti-Tray.
3. Результаты должны соответствовать приведенной выше таблице интерпретации результатов.

ПРИМЕЧАНИЕ: Тестирование внутреннего контроля качества IDEXX проводится в соответствии с ISO 11133:2014. Сертификаты контроля качества доступны на сайте idexx.com/water.

Процедуры контроля качества - фекальные колиформные бактерии

1. Для каждой партии Colilert-18 рекомендуется одна из следующих процедур контроля качества:

• Контроль качества фекальных колиформных бактерий IDEXX: Escherichia coli и Pseudomonas aeruginosa.

• Quanti-Cult Escherichia coli (фекальные колиформные бактерии), Kiebsiella pneumoniae (фекальные колиформные бактерии) и Pseudomonas aeruginosa (нефекальные).

• Заполните два стерильных флакона 100 мл стерильной воды без буфера и окислителя и с помощью стерильной петли штаммов ATCC, Escherichia coli ATCC 11775 (фекальные колиформные бактерии) и Pseudomonas aeruginosa ATCC 10145 или 27853 (нефекальные колиформные бактерии).

2. Следуйте описанной выше процедуре подсчета количества Quanti-Tray.
3. Результаты должны соответствовать приведенной выше таблице интерпретации результатов.

Как использовать тест для диагностики воды

Просмотрите видео и  узнайте, как использовать тест Colilert-18

Наличие/Отсутствие

Количественная оценка