Тест для воды Legiolert

​Legiolert - это тест, который обнаруживает бактерий Legionella pneumophila (легионелл пневмобилий) в пробах воды. Этот тест основан на технологии обнаружения бактериальных ферментов, при которой о наличии Legionella pneumophila в образце сообщается сигналом посредством использования субстрата, присутствующего в реагенте Legiolert. Клетки Legionella pneumophila быстро растут и размножаются, используя богатый запас аминокислот, витаминов и других питательных веществ, присутствующих в реагенте Legiolert. Результатом использования добавленного субстрата активно растущими штаммами Legionella pneumophila становится появления индикатора коричневого цвета. Тест-набор Legiolert обнаруживает Legionella pneumophila в количестве 1 организм на 100 мл в течение 7 дней.

Хранение

Хранить при температуре 2-25°C в защищенном от света месте.

Подготовка пробы питьевой воды (только для использования проб из окружающей среды)

Протокол для 10 мл
1. Добавьте 90 мл стерильного разбавителя (например, деионизированной воды, фосфатного
буфера/ буфера Баттерфилда или 0,1% пептона) в стерильный флакон без тиосульфата натрия.
2. Добавьте 10 мл воды.
3. Доведите образец до комнатной температуры.
4. Добавьте содержимое блистерной упаковки Legiolert к образцу. А,B
5. Встряхивайте, пока содержимое не растворится. Образец может оставаться мутным.

Протокол для 100 мл
1.Соберите 100 мл образца в стерильный флакон.
2.Доведите образец до комнатной температуры.
3.Используя тест-полоску для определения жесткости (входит в комплект дополнительного набора Legiolert 2 ), выполните следующие действия инструкции производителя, чтобы определить, имеет ли ваш образец низкую или высокую жесткость. Считайте, что 0–2 положительных результата – это образец с низкой жесткостью, а 3–4 результата положительных – с высокой.
4. Добавьте соответствующую добавку (входит в дополнительный комплект) следующим образом: В течение непродолжительного времени встряхните флакон с добавкой перед его использованием, затем для проб низкой жесткости добавляют 0,33 мл добавки, а для проб высокой жесткостью - 1,0 мл.
5. Добавьте к образцу содержимое блистерной упаковки Legiolert. A, B 
6. Встряхивайте, пока содержимое не растворится. Образец может оставаться мутным.

Подготовка пробы непитьевой воды (только для использования проб из окружающей среды) 

Протокол для 0,1 мл
1. Добавьте 100 мл стерильного разбавителя (например, деионизированной воды, фосфатного буфера/ буфера Баттерфилда или 0,1% пептона) в стерильный флакон без
тиосульфата натрия.
2. Добавьте содержимое блистерной упаковки Legiolert к образцу. А,B
3. Встряхните, пока содержимое не растворится. Раствор может оставаться мутным.
4. Добавьте 0,2 мл реагента Legiolert для предварительной обработки пробы в микропробирку. 3
5. Добавьте 0,2 мл пробы непитьевой воды в ту же микропробирку и хорошо перемешайте.
6. Инкубируйте микропробирку при комнатной температуре в течение 60 секунд (± 5 секунд).
7. Перемешайте содержимое микропробирки и немедленно перенесите 0,2 мл во флакон, содержащий Legiolert, и хорошо перемешайте.

Протокол для 1,0 мл
1. Добавьте 100 мл стерильного разбавителя (например, деионизированной воды, фосфатного буфера/буфера Баттерфилда или 0,1% пептона) в стерильный флакон без
тиосульфата натрия.
2. Добавьте содержимое блистерной упаковки Legiolert во флакон. A, B
3. Встряхивать, пока содержимое не растворится. Решение может оставаться мутным.
4. Добавьте 2,0 мл препарата Legiolert для предварительной обработки в стерильную пробирку. 3
5. Добавьте 2,0 мл образца непитьевой воды в ту же пробирку и хорошо перемешайте.
6. Инкубируйте пробирку при комнатной температуре в течение 60 секунд (± 5 секунд).
7. Перемешайте содержимое пробирки и сразу же перенесите 2,0 мл во флакон, содержащий Legiolert, и хорошо перемешайте.

Процедура подсчета Quanti-Tray*
Только для образцов для контроля качества (QC) и аттестационного
испытания (PT):

• Инкубируйте все пробы питьевой воды или пробы для контроля качества и для аттестационного испытания при температуре 39 ± 0,5°C в течение 7 дней.
• Инкубируйте все пробы непитьевой воды при 37 ± 0,5°C в течение 7 дней.

​6. Quanti-Tray/Legiolert необходимо инкубировать бумажной стороной вниз и лунками вверх в среде, что минимизирует потерю воды Quanti-Tray (либо при высокой влажности, либо в помещении, которое задерживает влагу). Для большей стабильности складывайте лотки, чередую их между собой. Е Не извлекайте лотки из инкубатора полностью до выполнения окончательного считывания.

 Количественные результаты Legiolert являются окончательными через 7 дней. Кроме того, лунки с положительными результатами, наблюдаемые до истечения 7 дней, и лунки с отрицательными результатами, наблюдаемые по прошествии 7 дней, также являются действительными. Сама по себе мутность указывает на рост Legionella pneumophila, тогда как индикатор может проявляться не так быстро или сильно. 

Процедурные заметки  

• Для сравнения при интерпретации результатов можно использовать инкубированную стерильную холостую пробу разбавителя, содержащую реагент Legiolert (отрицательный контроль).

• Тест Legiolert - это исследование исходной воды (воды первого контура). Рабочие характеристики теста Legiolert не применимы к образцам, измененным путем предварительного обогащения или концентрирования.

• При использовании теста Legiolert всегда следует соблюдать правила асептики. Утилизируйте материалы в соответствии с надлежащей лабораторной практикой.

Процедуры контроля качества

• Целевые микроорганизмы: Legionella pneumophila ATCC 33152/WDCM 00107 и/или ATCC 33156/WDCM 00180; нанесите культуру на забуференный угольный дрожжевой экстракт (BCYE) и инкубируйте при 35°C в течение 48-72 часов.
• Нецелевые микроорганизмы: Enterococcusfaecalis ATCC 29212/WDCM 00087, нанесите культуру на чашку с кровяным агаром и инкубируйте при 35°C в течение 18-24 часов.
• Для каждого бактериального штамма инокулируйте стерильный флакон, содержащий 100 мл стерильного разбавителя (например, деионизированную воду, фосфатный буфер/буфер Баттерфилда или 0,1% пептон), целевыми микроорганизмами в количестве от 10 2 до 10 3 КОЕ или нецелевыми микроорганизмами в количестве от 10 3 до 10 4 КОЕ.

ПРИМЕЧАНИЕ: Тестирование внутреннего контроля качества IDEXX проводится в соответствии с ISO 11133:2014. Сертификаты контроля качества доступны на сайте
idexx.com/water.
1 Знак проверки NF компанией AFNOR Certification распространяется на протокол для питьевых проб объемом 100 мл и протокол для непитьевых проб объемом 1,0 мл.
2. Комплект добавок Legiolert, WLGT-SUP, 98-0005745-00
3. Реагент для предварительной обработки Legiolert, WLGT-PRE, 98-0007740-00
4.Контролья качества для теста на обнаружения Legionella pneumophila производства компании IDEXX, UN3373-WQC-LP 98-0009287-00
5. Американская коллекция типовых культур ATCC 1-800-638-6597 www.atcc.org
6. Всемирный центр данных по микроорганизмам WDCM www.wdcm.org

Как использовать тест для диагностики воды /Просмотрите видео и  узнайте, использование Легиолерта